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不同类型非洲猪瘟检测仪器的检测限存在差异,以下为你详细介绍常见仪器及其大致检测限情况:
荧光定量PCR检测仪
原理及检测限范围:荧光定量PCR检测仪基于核酸扩增技术,通过特异性引物和探针识别非洲猪瘟病毒核酸,在扩增过程中实时监测荧光信号变化。其检测限通常在每微升样本中10 - 1000个病毒核酸拷贝数。例如,一些针对非洲猪瘟病毒p72基因设计的荧光定量PCR试剂盒,在优化条件下,能检测到每微升样本中约50个拷贝数的病毒核酸。
影响因素:检测限会受多种因素影响。样本质量是关键因素之一,若样本中病毒核酸降解或存在抑制物,会降低检测灵敏度,使检测限升高。此外,引物和探针的设计、PCR反应体系的优化程度等也会影响检测限。
数字PCR检测仪
原理及检测限范围:数字PCR将样本分割成大量微小的反应单元,在每个单元中进行独立的PCR扩增和荧光检测,通过统计阳性反应单元的数量来计算病毒核酸的浓度。其检测限可低至每微升样本中1 - 10个病毒核酸拷贝数。比如,在检测非洲猪瘟病毒时,数字PCR技术能更精准地检测到极低浓度的病毒核酸。
影响因素:样本分割的均匀性和微反应单元的数量会影响检测限。分割越均匀、微反应单元数量越多,检测的准确性和灵敏度就越高,检测限也就越低。同时,仪器的荧光检测灵敏度和数据分析算法也会对检测限产生影响。
胶体金免疫层析检测仪
原理及检测限范围:胶体金免疫层析检测仪利用抗原抗体特异性结合的原理,通过胶体金颗粒标记抗体,与样本中的非洲猪瘟病毒抗原结合形成肉眼可见的条带,仪器再对条带进行光学扫描和分析。其检测限相对较高,一般在每毫升样本中103 - 105个病毒颗粒或抗原单位。例如,某些胶体金试纸条配套的检测仪,对于病毒含量较低的样本可能无法准确检测出阳性结果。
影响因素:检测限受抗体特异性和亲和力、胶体金颗粒的标记效率以及检测仪的光学检测灵敏度等因素影响。抗体的特异性和亲和力越高,胶体金颗粒标记越均匀,检测仪的灵敏度越高,检测限就越低。