网站首页产品展示荧光定量分析仪非洲猪瘟试剂盒 > JD-ZWSJ2非洲猪瘟快速诊断试剂盒
非洲猪瘟快速诊断试剂盒

非洲猪瘟快速诊断试剂盒

产品型号: JD-ZWSJ2

所属分类:非洲猪瘟试剂盒

更新时间:2021-03-26

简要描述:非洲猪瘟快速诊断试剂盒注意事项:样品、阳性对照等在使用后及时封盖,.避免组分间及气溶胶等的污染造成假阳性。

详细说明:

品牌其他品牌加工定制
产品种类便携

非洲猪瘟快速诊断试剂盒注意事项:样品、阳性对照等在使用后及时封盖,.避免组分间及气溶胶等的污染造成假阳性。

非洲猪瘟快速诊断试剂盒

  核酸DNA提取试剂盒(柱膜法)使用说明书

  【产品名称】

  通用名称:病毒DNA提取试剂盒

  英文名称:Extraction Kit for Virus DNA

  【预期用途】

  本试剂盒主要用于疑似病毒等病原感染抗凝血、血淸、拭子、组织、饲料及环境中的病毒DNA的提取,纯化的核酸可适用于各种常规操作及PCR试验。

<strong><strong><strong><strong><strong>非洲猪瘟快速诊断试剂盒</strong></strong></strong></strong></strong>

  【试剂盒组分】

  I、试剂盒组成及贮藏条件

名称

20 T

50 T

1、吸附柱

20个

50

2、收集管

20个

50

3、裂解液

mL

11 mL

4、洗液I

13 mL

32 mL

5,洗液II

13 mL

32 mL

6.洗脱液

1.2 mL

3 mL

  2、 保存条件及有效期:室温下保存,有效期12个月.

  3、 需自备材料:无水乙醇、1.5 mL无菌离心管、1.5 mL无菌离心管(长臂型)、生理盐水、研钵、无菌

  1mL, 2OOuL、10uL枪头、记号笔等。

  【操作步骤】

  一、样品制备

  1、 血液样品:抗凝血样品置离心管中,8000转/分钟离心2分钟,取上层血浆;非抗凝血样品置离心 管中,待凝固后,8000转/分钟离心2分钟,取上层血清,置于灭菌离心管中,编号待检。

  2、 组织样品:采集脾脏、肝脏、淋巴结、扁桃体等病变组织样品0.1g.组织匀浆器或研钵中充分匀浆或研磨,加入1 mL生理盐水混匀,8000转/分钟离心2分钟,取上清于灭菌离心骨中,编号待检。

  3、 口腔液:进食前用拭子/口腔液采集袋或自制棉线绑纱布团吸引动物咀嚼,收集口腔液大于 500uL, 8000转/分钟离心2分钟,取上清于灭菌离心管中,编号待检。

  4、 饲料:取适量研磨后的饲料(约0.2g),放入含1 mL生理盐水或PBS(PH为7.4)缓冲液的2 mL EP 管屮,振荡混匀,8000转/分钟离心2分钟,取上清于灭菌离心管中,编号待检.

  5、 灰尘:用无菌棉签蘸取适量环境表面上的灰尘,放入含1 mL生理盐水或PBS(PH为7.4)缓冲液的2 mL EP管中,振荡混匀,8000转/分钟离心2分钟,取上清于灭菌离心管中,编号待检。

  二、DNA的提取

  1、取裂解液200uL加入无核酸酶1.5 mL离心曾屮,分别加入血浆/血清/组织液等样品液200uL. 震荡混匀10秒或颠倒混匀10次,室温放置5分钟(如果室内温度较低时.需放置25C水浴温育),再加入200uL无水乙醇,颠倒混匀10秒;若样品浑浊则先12000转/分钟离心1分钟处理,取上清液,以避免堵塞柱子;

  2、 将液体转入套有收集管的吸附柱中, 12000rpm离心1分钟:

  3、 弃收集管液体,向吸附柱中加600uL洗液I , 12000 rpm离心1分钟;

  4、 弃收集管液体,向吸附柱中加600uL洗液II, 12000 rpm离心I分钟;

  5、 弃收集管液体,12000 rpm离心2分钟,以彻底去除残留洗液;

  6、将吸附柱转入新的无核酸酸1.5mLEP管(长臂型)中,向柱滴加50 uL洗脱液,静置1分钟, 12000 rpm离心1分钟,EP管中液体即为病毒DNA。

  【注意事项】

  1、 实验前诺仔细阅读本试剂盒说明书,严格按照操作步骤执行.在操作过程中对时间、试剂体积等 粘确控制可以获得好的结果。

  2, 样本应新鲜采集使用,或低温运输储存;

  3, 样本具有潜在感染风险,核酸的提取应在核酸提取实验室的生物安全柜中进行。

  4、 核酸提取冇关耗材确保高温灭菌,提取后核酸尽快进入下一步试验或冷冻保存待用。

  5, 试剂使用前应混合均匀,试剂具有一定腐蚀性,使用时请戴手套、口zhao做好防护。

  6. 低温下裂解液出现结晶数属正常现象,可在60°C水浴加热助溶后使用。

  7、 实验产生的废弃物应及时收集,远离PCR实验室进行无害化处理。

  仅供兽医诊断使用

  非洲猪瘟病毒荧光PCR核酸检测试剂盒说明书

  【兽药名称】

  通用名称:非洲猪瘟病毒荧光PCR核酸检测试剂盒

  汉语拼音:Feizliouzhuwen Bingdu Yingguang PCR Hesuan Jianceshijihe

  英文名称:African swine Fever Virus (ASFV) PCR Nucleic Acid Diagnostic Kit

  商品名称:无

  【主要成分与含量】试剂盒中含有如下组分:

试剂盒组分

含量

阳性对照

250μL/管×1管

 

阴性对照

250μL/管×1管

 

PCR反应液

850μL/管×1管

 

萌混合液

150μL/管×1管

 

说明书

1份/盒

【作用与用途】 本试剂盒可用于血液、脾脏、肝脏、淋巴结、 样品中非洲猪瘟病毒核酸的检测。

扁桃体、肾脏、肌肉、环境样品等

  【用法与判定】

  1 用法

  1.1待检样品釆集、保存及运输

  1.1.1样品釆集

  (1) 活猪样品 无菌采集抗凝血或血清5mL

  (2) 病死猪剖检样品或屠宰场剖检样品 无菌采集死猪的牌、肺、肾、扁桃体、淋巴结、肌肉等组织样品。2〜8°C低温运至实验室用于检测。

  (3) 病猪污染的周边环境 采集与病猪相关场所的粪便、饲料、污水样品。2〜8°C低温运至实验室用于检测。

  1.1.2样品保存 采集的样品在2〜8°C保存应不超过24小时,-70°C条件下保存,避免反复冻 融。

  1.1.3样品运输泡沫箱加冰袋后密封进行运输。包装和运输应符合《高致病性动 物病原微生物菌(毒)种或者样品运输包装规范》和关于危险品运输管理的有关规定。

  1.2样品处理

  1.2.1血液样品处理 抗凝血样品置于离心管中,8000 r/min离心2分钟取上层血浆,编号待 检。非抗凝血样品置于离心管中,待凝固后,8000 r/min离心2分钟取200μL上层血清,编号待检。

  1.2.2组织样品处理取适量脾脏、肝脏、淋巴结、扁桃体、肌肉等组织,置于研磨器或研磨管中研磨,再加适量生理盐水混匀,制成约10%的组织匀浆,8000 r/min离心2分钟,取200μL上 清于RNase/DNase-free无菌离心管中,编号备用。

  1.2.3环境样品处理

  1.2.3.1粪便、饲料样品处理方法取适量的粪便、饲料放入盛有PBS缓冲液的研磨管中研磨混匀,制成约10%的匀浆液.8000 r/min离心2分钟,取200μL上清于RNase/DNase-free无菌离心 管中,编号备用。

  1.2.3.2污水样品处理方法 直接取200μL污水进行核酸提取。

  1.3病毒核酸的提取用磁珠法或柱式法进行DNA核酸提取。

  1.4荧光PCR反应:

  1.4.1从试剂盒中取出荧光PCR反应液、酶混合液,室温融化后,2000 r/min离心5秒。设被 检样品、阳性对照和阴性对照总和为n,则反应体系配制如下:

  试剂 体系

  PCR 反应液 17× (n+1) μL

  酶混合液 3× (n+1) μL

  1.4.2在新的RNase/DNase-fire 1.5 ml离心管中加入上述试剂,充分混匀后瞬时离心。按照20μL/ 管分装量将试剂分装至荧光PCR反应管。

  1.4.3在上述制备好的荧光PCR反应管中分别加入阴性对照、阳性对照各5μL、处理好的待测核酸各5μL,终体积25μL/管,盖好荧光PCR反应管盖,混匀后瞬时离心,转移到荧光PCR仪器 上。

  144将PCR反应管放置在荧光PCR仪样品槽中,在荧光PCR仪上运行以下程序:

步骤

条件

循环数

UNG处理

50 ℃2分钟

1

预变性

95 ℃3分钟

1

预扩增

95 ℃: 8 秒 55 ℃: 8 秒

 

5

PCR扩増

95 ℃: 8 秒 55 ℃: 8 秒

 

40

  荧光通道选择FAM,在PCR扩增阶段每个循环的55℃时采集荧光信号。设置扩增体系为25μL, 同时要选择passive reference和quencher为none的模式。(注:若荧光PCR仪(如AB17500)按说明 书中的反应程序设置后因持温时间短无法运行,可将预扩增和PCR扩增条件变更为95C: 5秒 55°C: 30 秒)

  2结果判定

  2.1试验有效性判定

  阳性对照有典型扩增曲线且Ct值≤30.且阴性对照无Cl值或无扩增曲线,线形为直线或轻微斜线,无指数增。则判试验结果有效。否则,此次试验视为无效。

  2.2样品判定

  2.2.1阳性:样本检测结果Ct值≤35且有明显指数增,判定检出非洲猪瘟病毒核酸。

  2.2.2可疑:样本检测结果Ct值在35〜38范围内。此时应对样本进行重复检测,如果重复实验 结果Ct值仍在35〜38范围内,有明显指数增.则判定为阳性,否则为阴性。

  2.2.3阴性:样本检测结果Ct值>38或无Ct值,判定未检出非洲猪瘟病毒核酸。

  【注意事项】(1)实验前请仔细阅读本试剂盒说明书,严格按照操作步骤执行,在操作过 程中对时间、试剂体积等精确控制可以获得好的结果。

  (2) 实验室应严格按照有关规定分区管理,依照配液区-模板提取区-扩增区-分析区顺序 进行基因检测。各区间人员、器材、试剂及空气流向应有严格要求。

  (3) 核酸提取有关耗村确保洁净、无DNase/RNase,提取过程尽量低温、快速,完成后进入 下一步实验或冻保。

  (4) 对于顶部采光仪器要带新的一次性PE手套对荧光PCR管封盖,对于底部采光仪

  器要避免徒手或使用过的手套接触荧光PCR管底,检测过程中使用不带荧光物质一次性乳胶手套。

  (5) 冻存试剂使用前应于室温下完全融化,瞬时离心使液体完全沉于管底。避免反复冻融, 以免影响试剂性能。

  (6) 样品、阳性对照等在使用后及时封盖,.避免组分间及气溶胶等的污染造成假阳性。

  (7) 扩增产物禁止开盖,实验产生的废弃物应及时收集,远离PCR实验室进行无害化处理。

  【规格】50头份/盒

  【贮藏与有效期】试剂盒置-20°C以下避光保存,有效期12个月。

  【批准文号】兽药生字163668871



留言框

  • 产品:

  • 您的单位:

  • 您的姓名:

  • 联系电话:

  • 常用邮箱:

  • 省份:

  • 详细地址:

  • 补充说明:

  • 验证码:

    请输入计算结果(填写阿拉伯数字),如:三加四=7

在线咨询
联系电话